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新品推薦:Lipofectamine? 3000 試劑

發(fā)布時間: 2015-08-19

日期:2015-08-19????????? 文章來源:Thermo fisher 官網(wǎng)

在難處理細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率高10倍

能轉(zhuǎn)染難處理細(xì)胞的通用型試劑:

  1. 最高的效率—適用于各種難以轉(zhuǎn)染的以及常見的細(xì)胞類型
  2. 溫和低毒—細(xì)胞活性更高
  3. 功能多樣—適用于DNA、RNA和共轉(zhuǎn)染的試劑盒


在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞類型中具有廣泛的優(yōu)良性能
?Lipofectamine? 3000試劑充分利用了我們先進的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),實現(xiàn)了超高轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的試驗結(jié)果。其可在最廣泛的難轉(zhuǎn)染和通用細(xì)胞類型(圖1)中獲得非凡的轉(zhuǎn)染效率,同時提升細(xì)胞存活率。

圖1. Lipofectamine? 3000試劑勝過了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉(zhuǎn)染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細(xì)胞系,并在轉(zhuǎn)染后48小時分析GFP表達(dá)情況。在所有五種細(xì)胞系中,Lipofectamine? 3000都表現(xiàn)出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP轉(zhuǎn)染效率。

圖2. Lipofectamine? 3000操作手冊在保持易用性的同時,還保持了優(yōu)異的性能和可靠性,適用于廣泛的細(xì)胞系類型。

溫和低毒

圖3.采用指定劑量的每種試劑,通過綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)載體,以96孔形式轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染后48小時,采用流式細(xì)胞儀進行分析,以測定百分比形式的轉(zhuǎn)染效率以及GFP表達(dá)強度。相對于Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? LTX試劑,Lipofectamine? 3000試劑表現(xiàn)出了更高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)水平。


增強您的癌癥研究工作

Lipofectamine? 3000試劑與暢銷的Lipofectamine? 2000試劑相比,在多種組織來源的癌癥細(xì)胞中具有更高的轉(zhuǎn)染效率。在所選的癌癥細(xì)胞系中,使用Lipofectamine? 2000僅有25%被認(rèn)為易于轉(zhuǎn)染(>50%的轉(zhuǎn)染效率),而使用Lipofectamine? 3000卻有60%的細(xì)胞系是易于轉(zhuǎn)染的。

圖4. 采用Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? 3000試劑將表達(dá)GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至17種癌癥細(xì)胞系中,利用各試劑推薦的實驗方案,在24孔板中進行轉(zhuǎn)染,每孔質(zhì)粒用量為0.5μg。轉(zhuǎn)染48小時后分析GFP表達(dá)情況。重復(fù)檢測3次,數(shù)據(jù)點顯示平均轉(zhuǎn)染效率 + 標(biāo)準(zhǔn)差。


生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSCs

圖5. 結(jié)果來自于明場顯微鏡,(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)都表明在生成iPSC細(xì)胞群落時重編程成功了。使用堿性磷酸酶進行末端染色。


改善基因組編輯結(jié)果

開發(fā)Lipofectamine? 3000試劑,旨在突破輸送技術(shù)的界限,促進生物相關(guān)系統(tǒng)內(nèi)的新技術(shù)發(fā)展,例如基因組編輯。通過這一新試劑,GeneArt? TALs??CRISPR?可以靶向HepG2U2OS細(xì)胞內(nèi)的AAVS1位點,同時表現(xiàn)出更佳的轉(zhuǎn)染效率、平均熒光強度和基因組切割效果。這些改進之處有助于最大限度減少繁重的下游工作,更便于進行干細(xì)胞處理,增強轉(zhuǎn)基因在細(xì)胞基因組中的位點特異性插入。

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圖6.?GeneArt? TALs?和?CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中的AAVS1位點。采用GeneArt?基因組切割檢測試劑盒分析切割效率。

圖7. 使用CRISPR載體時的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達(dá)。該載體含有OFP報告基因,并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染到(A) U2OS和(B) HepG2細(xì)胞系中。柱狀圖所示為報告基因的表達(dá)。圖片所示為相應(yīng)細(xì)胞表達(dá)OFP的熒光圖。


轉(zhuǎn)染干細(xì)胞

圖8. 使用Lipofectamine ? 3000轉(zhuǎn)染H9干細(xì)胞 (A)或iPSC (B)

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