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如何加速您的GTPASES研究?

發(fā)布時間: 2019-03-29


在過去的幾十年中,全球科學(xué)家一直在研究小GTPases在癌癥中的作用。激動人心的研究結(jié)果表明小GTPase能影響多種細(xì)胞過程,進而影響癌癥進程,包括細(xì)胞骨架動力、細(xì)胞周期進程、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞存活和囊泡運輸。


我們的Thermo Scientific? GTPase pull-down和檢測試劑盒能夠協(xié)助您的活性和組裝GTPase復(fù)合物研究。

這些試劑盒通過選擇性富集G T P a s e 活性形式,實現(xiàn)GTPase活性研究。它們包含了一個GST蛋白結(jié)合區(qū)域(PBD)融合,對活性Rho,Ras,Rac1,Cdc42,Rap1或Arf1選擇性結(jié)合。不同的下游效應(yīng)蛋白的蛋白結(jié)合區(qū)域表達(dá)為GST融合蛋白。固定在谷胱甘肽瓊脂糖樹脂上,蛋白結(jié)合區(qū)域會結(jié)合細(xì)胞裂解液中的活性GTP連接的GTPase。

應(yīng)用

? 在細(xì)胞分化、遷移、分裂和細(xì)胞骨架重組中跟蹤小GTPases活性。

? 研究壓力纖維形成過程中GTPase活性

? 監(jiān)控生長因子刺激后活性

? 篩選影響活性小分子抑制因子

我們的活性GTPase拉下和檢測試劑盒提供有效方式,使用時間相關(guān)活性分析監(jiān)控GTPase酶功能敏感變化,幫助科學(xué)家評估小GTPases在某些疾病,比如癌癥和代謝疾病中的參與度。


每日英雄

Roman Fischer

Roman Fischer博士

英國牛津大學(xué)

Thermo Scientific TMT

研究基金2017金級獲獎?wù)?/p>


研究領(lǐng)域:Fisher博士領(lǐng)導(dǎo)牛津大學(xué)靶點發(fā)現(xiàn)研究所蛋白組部。他的職業(yè)專長涵蓋了從基礎(chǔ)研究項目到臨床新藥物靶點和市場開發(fā)等合作工作,甚至還有古蛋白組。目前Fisher博士和他的團隊關(guān)注的是樣品準(zhǔn)備方法的篩選,以此來增強使用有限的臨床材料進行深度蛋白組研究靈敏度和效率。

挑戰(zhàn):培養(yǎng)細(xì)胞深度蛋白組是很容易獲得的。但是,從有限的生物材料-比如組織部分或某種表型的單個分離細(xì)胞(比如通過排列或激光捕獲,顯微切割)-中檢測到>2000蛋白質(zhì)還是相當(dāng)困難的,而后者相當(dāng)接近單細(xì)胞蛋白組。

他是如何解決這一困難:Fisher博士和他的團隊使用 Purkinje神經(jīng)元激光捕獲顯微切割,評估不同樣本準(zhǔn)備方法從少量細(xì)胞中辨識出最多蛋白的效率。蛋白微珠固定加上后續(xù)消化(SP3方法)獲得的可識別蛋白數(shù)量最多,比標(biāo)準(zhǔn)溶液內(nèi)消化、FASP和iST方法都要多。

好結(jié)果:SP3方法能夠大約從200個Purkinje細(xì)胞中檢測出>2500蛋白質(zhì)。團隊通過把這種方法和串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)簽(TMT)試劑和初步組分分離相結(jié)合,預(yù)期能夠從一個樣本中對不同腦細(xì)胞類型進行深度蛋白質(zhì)檢測和定量分析,從而在細(xì)胞精度水平上獲得空間蛋白分析結(jié)果。



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